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API鉴定试剂条使用基础知识

近来鼓励小朋友将自己岗位学习的东西进行总结,然后分享给大家。阳性试验组的小朋友在昨天进行了API鉴定试剂条的培训,现个人将培训内容进行总结梳理如下。了解微生物的基础知识有助于我们理解API鉴定的原理和
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近来鼓励小朋友将自己岗位学习的东西进行总结,然后分享给大家。阳性试验组的小朋友在昨天进行了API鉴定试剂条的培训,现个人将培训内容进行总结梳理如下。
了解微生物的基础知识有助于我们理解API鉴定的原理和在API鉴定过程中更容易做到举一反三快速掌握API鉴定这项技能。因为API鉴定主要适用于细菌的鉴定,此处分享细菌的形态、营养需求等基础知识,不对微生物的定义、分类及结构等内容进行赘述(大家已熟知)。
1.细菌的营养需求
我们熟知细菌含有C、N、O、H等各种元素,细菌的生长需要有碳源、氮源、无机盐及生长因子。
其中碳源是为细菌提供能量,对于细菌跟我们的日常主食一样。跟有人不能吸收牛奶一样,不同的细菌对不同碳源的利用效率是不同的,在API鉴定中对不同糖的利用效率可以用于细菌的分类鉴别。其次细菌利用碳源的方式不同、产物不同、引起pH等环境因素变化,这些不同或变化都可以用于细菌的鉴定。
也许是因为氮源作为构成细菌的蛋白质、核酸及其他化合物的材料,其重要性不言而喻。按来源其主要分为有有机氮源和无机氮源,对于部分细菌不使用有机氮源便不能生长,这可以用于细菌的鉴定。
生长因子的需求量很低,但是对于苛养菌的生长,生长因子是必不可少的,通过增加或减少生长因子我们可以对微生物进行鉴定。
补充:对于碳源的利用也就是我们常说的呼吸作用,此时需要氧气的细菌被称为需氧菌;需要较少氧气的可以称为微需氧菌、不需要氧气的为厌氧菌、需要二氧化碳的称为“Capnopilic bacteria”。根据呼吸需要的不同也可以进行细菌的鉴定。
2.微生物的繁殖
细菌以二分裂的方式进行增殖,很多细菌每二十分钟就可以实现一次增殖,一旦微生物度过调整期(或称延迟期)即可进入对数期快速增殖,此时其新陈代谢活跃,此时会产生各种生化代谢反应,在稳定期细菌会产生各种代谢产物,生长趋于平衡,在衰亡期开始死亡和代谢缓慢。为了确保实验现象的准确,我们需要选择处于对数期的细菌进行鉴定,如选用衰亡期的细菌,鉴定结果可能会出现错误。
俗话说,饱暖思淫欲,只是吃饱细菌不一定可以进行增殖,还需要适宜的温度,个人理解主要是温度影响酶的活性进而影响微生物的新陈代谢。普通的细菌和产芽孢的细菌的最适宜温度就不同,所以在鉴定时我们选择的试剂条也不同。
3.细菌的培养
前面我们说了细菌的生长营养需求,为了满足其需求我们准备了基础培养基(最少的应用元素,只管饱)、增菌培养基(基础+生长因子等,鼓励生娃)、选择培养基(基础+抗生素等,合不来的都得死)、显色培养基(基础+显色底物请留下你的罪证),我们可以根据我们的需求选择适宜的培养基。
培养基按照物理状态不同可以分为液体培养基(常说的肉汤)和固体培养基。其中液体培养基主要用来增菌但是由于其中生长的细菌形态区别不明显不能区分是多种细菌生长还是一种细菌生长。虽说区分不了是几种微生物,但可以根据微生物生长的位置区分细菌呼吸类型。图1为绝对需氧菌,无氧吾宁死,如假单胞菌、分枝杆菌;图二,兼性厌氧菌,肠道菌群属于这一类,他们的能量是通过发酵产生的;图3绝对厌氧菌,只会在没有氧气的情况生长,如生孢梭菌等;图4,微需氧细菌,较喜欢少氧气的环境生长,如弯曲菌。
API鉴定试剂条使用基础知识

菌种鉴定时我们需要将细菌分离,此时固体培养基制备的平板就是我们的宠儿了。一百万个细菌形成的菌落才能肉眼可见,预计需要微生物繁殖20代,所以我们划线后需要培养18-24h左右后进行下一步操作。
以上便是个人以为的常用基础知识,至于镜检、革兰氏染色等内容在鉴定过程中分享。
发布于 2021-09-11 23:23:48 © 著作权归作者所有
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