分子排阻色谱法

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204|中国药品检验标准操作规范2019年版
β-内酰胺抗生素中高分子杂质检查时使用Sephadex G-10凝胶色谱系统,在该分离系统
中,除部分寡聚物外,β一内酰胺抗生素中高分子杂质在色谱过程中均不保留,即所有的高分子
杂质表现为单一的色谱峰,以药物自身为对照品,按外标法计算药吊中高分子杂质的相对百分
通用检验方法
含量。
5注意事项
5.1分子排阻色谱法以淋出体积作为分子量的相对检测,所以基线的稳定性直接影响计算
结果,应待基线稳定30分钟以后开始进样。
5.2实验中应注意防止微物的污染,可以在流动相中加入0.02%的叠氮化钠作为抑菌剂。
5.分子排阻色谱的色谱柱填料多为多孔凝胶,耐压小,流速突然变大,压力升高容易引|
起柱填料塌陷、破碎,建议在冲洗色谱柱时,流速缓慢上升,不致压力突然升高。
5.4配好流动相后应以适宜的0.45μm或0.22um滤膜滤过,以除去杂质微粒,如流动相中
含有机溶剂,使用前应超声脱气。
5.5抗生素高分子聚合物分析用Sephadex G-10的处理方法。
5.6色谱柱的填装装柱前先将约15 g Sephadex G-10用水浸泡48小时,使之充分溶胀,
搅拌除去空气泡,徐徐倾入玻璃柱,一次性装满,然后用水将附着玻璃管壁的Sephadex G-lO
洗下,使色谱柱面整,新填装的色谱柱要先用水连续冲洗4~6小时,以排出柱中的气泡。
5.7样品的加入进样可以采用自动进样阀,也可以直接将样品加在柱床的表面,此时,
先将柱床表面的流动相吸干,将样品溶液沿着色谱管壁转圈缓缓加入,注意勿使填充剂翻起,
待供试液随着重力的作用渗入固定相后,再沿着色谱管壁转圈缓缓多次加入了~5流动相,
以洗下残留在色谱管壁的样品溶液。
参考文献
[1]国家药典委员会,中国药典分析技术指南[M].北京:中国医药科技出版社,2017:
212-215
[2]施良和.凝胶色谱法[M].北京:科学出版社,1980
气相色谱法
1简述
气相色谱法是利用气体作流动相的色层分离分析方法。汽化的试样被载气(流动相)带入
色谱柱中,柱中的固定相与试样中各组份分子作用力不同,各组份从色谱柱中流出时间不同,
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