一、 前言
洁净区的微生物监测，属于洁净区环境监测的一部分，同时微生物监测属于质量管理部门的相关工作。
对洁净区进行微生物监测的目的是，评估无菌生产的微生物状况，确保药品生产质量。
对微生物的监测方法有定量空气浮游菌、沉降菌采样法和表面取样法等。
接下我们本期将进行沉降菌的监测讲解
二、沉降菌的监测
沉降菌的定义
空气中的活微生物粒子，通过专门的培养基，在适宜的条件下繁殖可见的菌落数。
沉降菌菌落数
规定时间内每个平板培养皿收集到空气中沉降菌的数目，以个/皿表示。
进行监测的要点:
三、 监测条件
1、温度和湿度
洁净室(区)的温度和湿度应与其生产及工艺要求相适应（温度控制在18"C-28C，相对湿度控制在45% 65%之间）
2、压差
空气洁净度不同的洁净室(区)之间的压差应>5Pa,空气洁净度级别要求高的洁净室(区)对相邻的空气洁净度级别低的洁净室(区)一般要求呈相对正压。
3、测试状态
① 静态或动态均可进行测试。
② 静态测试时室内测试人员不得多于2人。
③ 测试报告中应标明测试状态及室内测试人数。
4、测试时间
① 静态a测试时，对非单向流洁净室，测试应在净化空气调节系统正常运行时间不少于30min后开始。
② 静态b测试时，对非单向流洁净室，测试宜在生产操作人员撤离现场并经过20min自净后开始。
③ 在动态测试时，须记录生产开始的时间及测试时间。
04不同洁净区的注意事项
静态A
静态B:
动态:
05测试步骤
1、选择合格的一次性成品培养基，测试前培养皿表面必须严格消毒，按采样点布置图逐个放置，然后从里到外逐个打开培养皿盖，使培养基表面暴露在空气中。
2、静态测试时，培养皿暴露时间为30min;动态测试时，培养皿暴露时间为3h。
3、全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。
4、采用大豆酪蛋白琼脂平板经采样后，在30*C~35*C培养箱中培养，时间不少于2d;
5、采用沙氏培养基(SDA)平板经采样后，在20C~25*C培养 箱中培养，时间不少于5d。
每批培养基应有对照试验，检验培养基本身是否污染。可每批选定3只培养皿作对照培养。
菌落计数
1、用肉眼对培养皿上所有的菌落直接计数、标记，然后用5~10倍放大镜检查，有否遗漏。
2、若平板上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。
06采样位置及采样点及分布
1、工作区采样点位置离地0.8m~1.5m左右，(略高于工作面) ;
2、可在关键设备或关键工作活动范围处增加测点。
07最少培养皿数言
10万级最少培养皿数为2个。结果评定：
1、每个测点的沉降菌平均菌落数必须低于所选定评定标准中的界限。
2、在静态测试时，若某测点的沉降菌平均菌落数超过评定标准，则应重新采样两次，
两次测试结果均合格才能判为符合。
References:
[1]《尘埃粒子数测定标准操作规程》附录
[2]《药品生产质量管理规范及附录》.无菌药品
