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细菌内毒素检查相关的“鸡毛蒜皮”小事

细菌内毒素检查除了计算和干扰试验需要烧脑外,涉及的小技巧和小细节挺多,个人将这些鸡毛蒜皮的小事进行了一下总结。1.&
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细菌内毒素检查除了计算和干扰试验需要烧脑外,涉及的小技巧和小细节挺多,个人将这些鸡毛蒜皮的小事进行了一下总结。
1.细菌内毒素检查的环境控制
1.1.细菌内毒素检查应在清洁环境中进行,过程中防止内毒素的污染;推荐使用生物安全柜,因为某些含辅助试剂的鲎试剂曾引起人员的过敏反应,需注意对人员的防护;
1.2.培养环境应与操作区域应在CNC区内,避免不受控因素引起干扰;
1.3.培养区域内应无振动源,避免因震动引起假阴性;
1.4.操作区域建议准备专门的记录书写区,避免操作人员借用培养区域台面进行记录书写引起震动。
2.操作区域内的5S管理
2.1.定置管理:将旋涡混合仪区域定为仪器区(多为左侧),右侧为耗材区放置枪头及空安瓿等耗材或试剂(左撇子可以考虑放在左侧),中间区域为操作区,除放支架、废弃枪头收纳盒和利器盒外不存放其他物品;
2.2.标识管理:对培养支架进行标识,便于实验过程中定位和复核数量;
3.实验前准备注意事项总结
3.1.无热原枪头并不只是无热原,同时需要对内毒素无吸附;
3.2.玻璃器具等可干热灭菌的器具干热灭菌时需要注意干热灭菌,需要注意是达温后计时;
3.3.实验所用的器具应计量合格且复核实验需求,移液枪需要注意做好期间核查;
3.4.反复灭菌使用的玻璃器具可以使用铬酸洗液进行清洗,可选择一次性安瓿代替玻璃试管用于溶液稀释(可以减少清洗和去热原的工作);
3.5.实验前需对实验所用鲎试剂及工作标准品的用量进行核算,一次备齐;
3.6.实验开始前确定稀释方案,确定4λ、2λ的制备量满足需求,特别是干扰试验时,为确保B组与C组同时进行试验需要提前计划;
3.7.稀释方案确定时,需要考虑移液枪量程级准确度,同时建议稀释方案张红移液体积尽量统一;
3.8.提前打开金属浴或水浴装置,特别是水浴需要较长时间平衡温度。
4.试验过程经验总结
4.1.因工作标准品的复溶需要较长时间,实验开始时先进行工作标准品的复溶;’
4.2.建议根据稀释方案,先加细菌内毒素检查用水后进行供试液制备及稀释,最后进行含内毒素样品的制备;
4.3.鲎试剂或空安瓿在从试剂盒中取出时在塑料托盘上标记;
4.4.玻璃瓶装鲎试剂瓶塞有鲎试剂粘附时建议在用瓶底敲打坚硬台面即可;
4.5.鲎试剂复溶时尽量避免产生气泡;
4.6.溶液制备和稀释过程及鲎试剂中溶液加入时,每一次加液完成都需要确认也液面高度,避免重复添加或移液错误;
4.7.实验过程中用到的安瓿级试管均应标记,不建议按记忆摆放;
4.8.凝胶反应不可逆,需要注意试验过程和观察结果时都要避免振动,否则可能会出现假阴性。
发布于 2021-04-30 08:20:52 © 著作权归作者所有
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